等電点マーカー (pI markers)

■　等電点マーカー (pI markers)

キャピラリー等電点電気泳動 (CIEF) では両性担体によってキャピラリー内に pH 勾配を発生させます。実際にキャピラリーの何処にどのような pH 勾配が生じているのかは、等電点マーカー（pI マーカー）を試料に加えることで知ることができます。pI マーカーは等電点が既知の物質で、タンパク質、ペプチド、低分子の有機化合物などが使われます。

志村らは焦点化しやすい 15 種のペプチド等電点マーカーをデザインし、それらの等電点を決定しました。デザインされたペプチドはトリプトファン (Trp) を１残基含み、280 nm の UV 吸収、または 340 nm の蛍光（280 nm 励起）で検出できます。これらのペプチド等電点マーカーはキャピラリー等電点電気泳動における標準的な pI マーカーとして世界中で利用されています。

No.*	Peptide	pI**	SD***
28	H-Trp-Tyr-Lys-Arg-OH	10.17	0.019
29	H-Trp-Tyr-Lys-Lys-OH	9.99	0.025
30	H-Trp-Tyr-Tyr-Lys-Lys-OH	9.68	0.029
31	H-Trp-Tyr-Tyr-Tyr-Lys-Lys-OH	9.50	0.022
33	H-Trp-Glu-Tyr-Tyr-Lys-Lys-OH	8.40	0.028
34	H-Trp-Glu-His-His-His-Arg-OH	7.27	0.012
35	H-Trp-Glu-His-Arg-OH	7.00	0.015
36	H-Trp-Glu-His-His-OH	6.66	0.024
37	H-Trp-Glu-Arg-OH	5.91	0.078
38	H-Trp-Glu-His-OH	5.52	0.025
39	H-Trp-Asp-Asp-His-His-OH	5.31	0.022
40	H-Trp-Glu-Glu-His-OH	4.28	0.035
41	H-Trp-Asp-Asp-Arg-OH	4.05	0.038
42	H-Trp-Glu-Glu-OH	3.78	0.038
43	H-Trp-Asp-Asp-Asp-OH	3.38	0.041

文献　　

1. Shimura K, Wang Z, Matsumoto H, Kasai K. Synthetic oligopeptides as isoelectric point markers for capillary isoelectric focusing with ultraviolet absorption detection. Electrophoresis 2000;21(3):603-610.
2. Shimura K, Wang Z, Matsumoto H, Kasai K. Accuracy in the determination of isoelectric points of some proteins and a peptide by capillary isoelectric focusing: utility of synthetic peptides as isoelectric point markers. Anal Chem 2000;72(19):4747-4757.

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志村らはまた、532 nm のレーザーで励起し、590 nm の蛍光検出に適した、ローダミン標識のペプチド等電点マーカーのデザインと等電点決定も行っています。

文献　　

• Shimura K, Kamiya K, Matsumoto H, Kasai K. Fluorescence-labeled peptide pI markers for capillary isoelectric focusing. Anal Chem 2002;74(5):1046-1053.